เป็นการวิเคราะห์หา เซลล์ที่ผลิตแอนติบอดี โดยอาศัยหลักการว่า แอนติบอดีต่อเม็ดเลือดแดงของแกะ (SRBC) จะทำให้เม็ดเลือดแดงนี้แตกเมื่อมีคอมพลีเม้นท์อยู่ด้วย (ดูภาพ, +C' คือ เติมคอมพลีเม็นท์ลงไป)

(source: see reference [1])

 

 

ถ้ากระตุ้นภูมิคุ้มกันของหนูเม้าส์ด้วยการฉีด SRBC เข้าช่องท้อง ตัวละ 2.5x108 เซลล์ (SRBC จะเป็นแอนติเจน ทำให้ร่างกายหนูเม้าส์สร้างเซลล์ที่ผลิตแอนติบอดีและเซลล์ภูมิคุ้มกันชนิดอื่นๆ) จากนั้นแยกม้ามมาเก็บเซลล์ม้ามในวันที่ 3-9 หลังกระตุ้น[2]  นำเซลล์ที่ได้มาหาปริมาณเซลล์ที่สามารถผลิตแอนติบอดีได้โดยวิธีทำดังนี้

  • นำเซลล์มากระจายในวุ้นกึ่งแข็งแล้วเทลงบนจานอาหาร
  • ปล่อยให้วุ้นแข็งตัวเกาะจานอาหารดีแล้ว
  • เทราดทับผิวหน้าด้วย SRBC
  • เติมคอมพลีเม้นท์ลงไปให้กระจายทั่ว
  • อ่านผล: จะพบว่าเม็ดเลือดแดงของแกะจะแตก ตรงบริเวณรอบๆเซลล์ที่สร้างและปล่อยแอนติบอดีออกมา จึงสามารถนับหาปริมาณเซลล์ที่สร้างแอนติบอดีได้ วิธีนี้เป็นวิธีที่มีความไวในการวิเคราะห์ดี

 

Reference

1. http://nfs.unipv.it/nfs/minf/dispense/immunology/cellmol.html

2. P. Thejass, G. Kuttan. Immunomodulatory activity of Sulforaphane, a naturally occurring isothiocyanate from broccoli (Brassica oleracea). Phytomedicine 14 (2007) 538–545

 

ชีวประวัติ คุณ Jerne, Niels Kaj (1911-1994) คลิก