ปัญหาที่พบของการใช้น้องแค็ป คือ พอใช้ไปได้สักพักแล้ว สัญญาณตอนท้ายจะแย่ลง ถ้าเป็น fragment analysis สัญญาณบริเวณ มากกว่า 300 bp จะมีฐานกว้างขึ้น ความสูงต่ำลง หากเป็น sequence ลำดับเบสที่มากกว่า 300 bp จะมีลักษณะของ peak ที่ขึ้นแล้วลงไม่สุด ความสูงลดลง หรือที่เรียกว่า low resolution นั่นเอง เมื่อเป็นมากๆ ก็ต้องเปลี่ยนน้องแค็ปใหม่

     ผมเริ่มรู้จักกับเครื่อง sequencer ที่ใช้หลักการของ Sanger ราวสัก 8-9 ปีที่แล้วครับ ก็ได้ลองผิดลองถูกมาโดยตลอด เพียงแต่ส่วนใหญ่มักจะเป็นการลองผิดซะมากกว่า ทุกครั้งที่ได้ลอง ไม่ว่าจะเป็นการลองผิด หรือ ลองถูกก็ตาม สิ่งที่ได้ก็คือความรู้ครับ หากลองแล้วไม่ได้ผล ก็ได้รู้ว่า ทำอย่างนี้แล้วแก้ไขปัญหาไม่ได้ ต้องหาวิธีการอื่น แต่ถ้าลองแล้วได้ผล ก็จะได้รู้ว่า หากเจอปัญหาอย่างนี้อีก ก็สามารถแก้ไขได้ด้วยวิธีการอย่างนี้ 

     หนึ่งในสิ่งที่อยากลองเล่นกับเครื่อง sequencer ก็คือ น้องแค็ป (capillary array) เมื่อออกจากโรงงาน บริษัทบอกว่า รับประกันการใช้งานได้ 100 runs ซึ่งจริงๆแล้ว ใช้ได้มากกว่านั้นเยอะครับ บางคนใช้ได้  400 runs บางคนใช้ได้   1,000 runs บางคนใช้ได้  2,000 runs อย่างน้องแค็ปตัวเก่าของผม ใช้ได้มากกว่า  3,000 runs ก่อนที่จะเกิดปัญหา probe งอ แล้วก็หักไป ปัญหาที่พบของการใช้น้องแค็ป คือ พอใช้ไปได้สักพักแล้ว สัญญาณตอนท้ายจะแย่ลง ถ้าเป็น fragment analysis สัญญาณบริเวณ มากกว่า 300 bp จะมีฐานกว้างขึ้น ความสูงต่ำลง หากเป็น sequence ลำดับเบสที่มากกว่า 300 bp จะมีลักษณะของ peak ที่ขึ้นแล้วลงไม่สุด ความสูงลดลง หรือที่เรียกว่า low resolution นั่นเอง เมื่อเป็นมากๆ ก็ต้องเปลี่ยนน้องแค็ปใหม่ ปัจจุบันน้องแค็ปขนาด 4 แค็ป มีราคาประมาณ  50,000 บาทครับ คำถามที่มักถามกันบ่อยๆ คือ แล้วมีวิธีการอะไรไหม ที่สามารถชุบชีวิตน้องแค็ปใหม่ได้ ทำให้เรากลับมาใช้น้องแค็ปเดิมได้อีก โดยไม่ต้องเปลี่ยน นั่นคือ เรากำลังพูดถึง น้ำยาวิเศษ ที่สามารถชุบชีวิตน้องแค็ปได้  ใช่ครับ การสร้างน้ำยาชุบชีวิตน้องแค็ป เป็นสิ่งหนึ่งที่ผมอยากลองเล่นกับเครื่อง sequencer มาโดยตลอด

     ในที่สุดผมก็ได้ลองครับ จากที่เล่าให้ฟังในบันทึกก่อนหน้านี้ เมื่อน้องแค็ปตัน แล้วได้ทำการทะลวง probe แล้ว ช่วยชีวิตน้องแค็ปได้ 3 แค็ป เหลืออีก 1 cap คือ Cap2 ที่ยังมีปัญหาฐานกว้างกว่าปกติ แม้จะทะลวง probe เพิ่มเติม ก็ไม่ทำให้สัญญาณดีขึ้น ทีนี้ก็มาถึงน้ำยาชุบชีวิตแล้วครับ 

     ผมได้ลองเตรียมน้ำยาชุบชีวิตน้องแค็ป โดยใช้สารเคมีทั่วไปที่หาได้จากในห้องแล็บมาเตรียมครับ วิธีการเตรียมก็ไม่ยุ่งยาก ใช้เวลาเตรียมประมาณ 10 นาที ได้มา 1 ลิตร แต่ผมขออนุญาตไม่เปิดเผยสูตรนะครับ ไม่ใช่ว่าผมหวง เพียงแต่ผมไม่อยากถูกฟ้องร้อง ว่าละเมิดลิขสิทธิ์ของบริษัทครับ

     จากนั้นก็ล้างน้องแค็ปด้วยน้ำยาชุบชีวิต ทิ้งไว้ประมาณ ครึ่งชั่วโมง แล้วล้างออกครับ แล้วลองสั่งใช้งานดู จะพบว่า น้องแค็ปให้สัญญาณที่สวยงาม เหมือนเพิ่งออกจากโรงงานใหม่ๆ

     อย่างภาพข้างล่าง เป็นน้องแค็ปตอนที่ยังมีปัญหาที่ Cap2 ครับ

     หลังจากชุบชีวิตแล้ว ได้สัญญาณของ Fragment analysis เป็นแบบนี้ครับ

     อีกภาพครับ สำหรับ Fragment analysis จะเห็นว่า สัญญาณที่ Cap2 ฐานไม่กว้างแล้วครับ ทั้งสี่แค็ปเหมือนเปลี่ยนน้องแค็ปใหม่

     หากเป็น sequence ก็จะได้สัญญาณสวยงามดังภาพข้างล่างครับ

     อีกภาพครับ จะเห็นว่าสัญญาณที่มากกว่า 8,000 datapoint มีลักษณะของ peak ที่ขึ้นสุดลงสุด ซึ่งในที่นี้อ่านไปได้ถึงมากกว่า 600 bp ครับ

     และแล้ว ความฝันก็เป็นจริงครับ ในที่สุดผมก็ได้เตรียมน้ำยาชุบชีวิตน้องแค็ปขึ้นมาได้แล้วครับ