เอกสารที่เขียนไว้เพื่อการอบรมเชิงปฏิบัติการ Realtime PCR and its applicationsในหัวข้อต่อไปเป็นการมารู้จักกับ PCR แบบ Real-time กันดูว่า จะทำความเข้าใจได้ง่ายๆยังไงกันดี

แปลตรงตัวได้ความหมายที่สุดคือ PCR ในขณะที่กำลังเกิดขึ้นจริงๆ ทำให้สามารถติดตาม PCR ในช่วง exponential phase ได้อย่างแม่นยำ ซึ่งนำไปสู่การวัดปริมาณได้ โดยมีสมการของ PCR ดังนี้

Xn = X0(1 + E)n

โดย Xn คือ ปริมาณ PCR product ที่ cycle ที่ n
 X0 คือ ปริมาณเริ่มต้นของ template
E คือ Amplification efficiency
 n คือ cycle number

สมการเหล่านี้ เราไม่ต้องจดจำเลย เพราะเครื่อง Real-time PCR ทุกชนิดมี software ที่รองรับการคำนวณปริมาณให้เราอยู่แล้ว เพียงแต่เราต้องเข้าใจธรรมชาติของปฏิกิริยา และวิธีการในการติดตามเก็บค่าต่างๆระหว่างที่ปฏิกิริยาดำเนินอยู่ รวมทั้งการแก้ไขปรับปรุงสภาวะเพื่อให้ปฏิกิริยามีประสิทธิภาพสูงสุดเท่าที่จะทำได้ จึงจะทำให้ผลที่ได้ถูกต้องแม่นยำ

ไม่ยากเลยใช่ไหมคะ ถ้าหากเราไม่คิดให้มันยุ่งยาก กระบี่อยู่ที่ใจ (เข้ากันไหมเนี่ย) ตอนหน้าจะเป็นการเปรียบเทียบให้เห็นว่า PCR ธรรมดากับแบบ real-time นี่ ต่างกันตรงไหนบ้างค่ะ

หัวข้อนี้ต่อมาจาก

ดาวน์โหลดเอกสารทั้งฉบับได้ตรงนี้เลยค่ะ Basic RealTime PCR