เข้าไปหาข้อมูลเพิ่มเติมจาก internet เกี่ยวกับสี giemsa ไม่รู้ว่าเตรียมเหมือนที่เราใช้ใน Lab หรือป่าวนะคับ
การเตรียม stock สี Giemsa
สารเคมีที่ใช้เตรียม:1.
giemsa
powder
2. glycerol
3. absolute
ethanol
วิธีเตรียม
บด Giemsa powder ด้วยครกบดสี โดยเติม glycerol
ในปริมาณเล็กน้อยก่อนแล้วค่อยๆ เติม Giemsa และเติม glycerol ต่อไป
โดยใช้ Giemsa 7.5 กรัม และ glycerol 250 มล. บดจนเป็นเนื้อเดียวกัน
หลังจากนั้นเติม absolute ethanol 750 มล.
ล้างสีออกจากครกให้หมดเก็บใส่ขวด แล้วนำไปบ่มในตู้อบอุณหภูมิ 37
องศาเซลเซียส เปิดจุกทิ้งไว้นาน 2-3 วัน จึงนำไปใช้ได้
ก่อนใช้นำไปละลายใน phosphate buffer โดยใช้ความเข้มข้นของสี Giemsa
20%การเตรียม phosphate buffer pH 6.8
สารเคมีที่ใช้เตรียม:
1.
KH2PO4
2. Na2HPO4
3. น้ำกลั่น
วิธีเตรียม
สารละลาย
A ชั่ง KH2PO4 9.1 กรัม ละลายในน้ำกลั่น
1,000 มล.สารละลาย B ชั่ง Na2HPO4 9.5 กรัม ละลายในน้ำกลั่น 1,000 มล.
เวลาใช้นำสารละลาย A 50.8 มล. ผสมกับสารละลาย B 49.2 มล. เขย่าให้เข้ากัน จะได้ phosphate buffer มี pH ประมาณ 6.8
การเตรียม 20% Giemsa
โดยการนำ phosphate buffer pH 6.8 มา 80 มล. เติม stock สี Giemsa 20 มล. ผสมให้เข้ากัน นำไปกรองด้วยกระดาษกรองแล้วนำไปใช้ได้