มีคำถามเกี่ยวกับการเลือก Tm ของ primers มาให้ตอบก็เลยได้มีโอกาสเข้าไปเลือกดูว่าโปรแกรมการคำนวณ Tm เป็นอย่างไรกันบ้าง ก็เลยได้เห็นว่าเดี๋ยวนี้มีหลายแหล่งออนไลน์มากเลยนะคะ เราเพียงแค่ใส่ primer sequence ของเราเข้าไป เขาก็ให้ค่า Tm ออกมา แต่ที่น่าเสียดายคือส่วนใหญ่ไม่บอกที่มาที่ไปเอาเสียเลย แต่พบว่ามีที่นี่ ค่ะ ที่ขอแนะนำให้ใช้ ซึ่งเป็นของ The Northwestern University Medical School เพราะเขามีการให้รายละเอียดด้วยว่าเขาคำนวณมายังไง มีข้อจำกัดอย่างไร และมีความเข้มข้นของ primer และ Na+ ให้เราเลือกได้ด้วย เป็นแหล่งที่ตัวเองก็ได้ใช้เมื่อกว่าหกปีที่แล้วที่ต้องทำงานพวกนี้อยู่
นอกจากนั้น ก็พบอีกสองเว็บไซต์ที่คิดว่าน่าจะเป็นประโยชน์กับผู้ที่สนใจเรื่อง PCR และ Melthing temperature ของ nucleotides เลยเอามารวมกันไว้ที่บันทึกนี้ด้วยค่ะ