ความเห็น 2987740

บันทึกจากแดนซากุระ 19 : เมื่อมือใหม่ถูกลองของ (2)

Ik
IP: xxx.47.200.44
เขียนเมื่อ 

รบกวนถามผู้มีประสบการณ์ค่ะ คือตอนนี้ทำ Multiplex pcr เกี่ยวกับ bacteria แล้วเกิดปัญหาการ contaminate ค่ะ ที่ lab ใช้ master mix สำเร็จรูป เวลาจะทำ sample จะเตรียมทุกอย่าง (master mix, DW, primer) ให้เป็น tube เดียว และแบ่งใส่ลงในแต่ tube โดย negative control ใส่ DW แทน DNA และ มี tube negative control ที่ใส่ DNA ของเชื้อตัวอื่น ที่ต้องไม่ขึ้น ใน pcr (ที่ lab ทำทุกอย่าง ใน hood และ ใช้ fillter tip) ที่ผ่านมาไม่มี contaminate แต่ตอนนี้พบ contaminate ที่ negative control จาก tube ที่เติมน้ำ และ ที่ใส่ DNA เชื้อ negative ซึ่ง แบนที่พบ มีขนาดเท่าแบนของ tube positive control ทุกแบน และความเข้มของแบน ใกล้เคียงมาก 

***ลองแก้ปัญหาโดยการเปลี่ยน master mix, DW, เตรียม stock primer ใหม่หมด แต่ผลออกมาเหมือนเดิมทุกประการ ยังเกิด contaminate แบบเดิม ไม่ทราบว่า ควรทำอย่างไรดีค่ะ ...รบกวนขอคำแนะนำด้วยค่ะ 

(อยากร้องไห้เลย T^T)